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尿碘快速定量检测试剂盒及尿碘检测方法

来源:半岛电竞官网app    发布时间:2024-05-14 23:44:54 半岛综合

  尿碘水平是评价人体碘营养状况的重要指标。通过检验测试尿碘含量可以诊断人体是否缺碘。

  尿中碘含量甚微,只有百万分之零点几;尿液成分复杂,干扰碘测定的物质很多。因此,测定尿碘一般都会采用先排除干扰物质,然后利用碘催化几种化学反应的性质,间接测定尿碘。

  德国默克公司1998年提出了尿碘半定量检测试剂盒,该试剂盒采用树脂过滤尿样,将干扰碘测定的有机物吸附在树脂上,取滤液进行测定。测定方法采用碘催化四甲基联苯二胺与双氧水的反应,根据双氧水将四甲基联苯二胺氧化成四甲基联苯二醌显现黄色,比较黄色的深浅程度来半定量判断尿碘含碘范围,检测分为<100μg/L、100-300μg/L和>300μg/L三档。

  本发明的目的是根据上述现状况,旨在提供一种能快速、准确检测出尿中碘含量的尿碘快速定量检测试剂盒及尿碘检测方法。

  本发明目的的实现方式为,尿碘快速定量检测试剂盒,试剂盒由以下主要试剂成分组成,(1)消解液由过氧化酰氯、次氯酸钠、二氧化氯复合组成或其中的单一成分组成,其总有效氯含量(以Cl2计)在0.3~1.2mol./L,(2)解析剂,为脲溶液,其浓度以脲计,为0.1~1mol/L,(3)中和剂硫酸、盐酸或磷酸溶液,其酸度以氢离子浓度,计为1~10mol/L,

  (4)还原剂由三氧化二砷溶于酸性溶液中制备成的亚砷酸溶液,其含量以三氯化二砷计,为1×10-3~0.5mol/L,(5)指示剂Ferroin(亚铁灵)溶液,其浓度以Ferroin计,为5.0×10-3~1.0×10-2mol/L,(6)氧化剂硫酸铈铵或硫酸铈溶液,含量为5×10-4~5×10-2mol/L。

  尿碘快速定量检测试剂盒检测尿碘的方法,具体步骤为(1)消解 准确移取50、100、200、300和400μg/L的系列碘标准溶液和尿样各0.1-1ml于试管中,各加0.2-2ml消解液,室温静置5分钟后剧烈振摇试管多次,致使反应产生的气体(主要为N2、O2和少量Cl2)排尽为止,消解全过程约需10-15分钟;(2)解析 每管加入0.2-2ml ml解析剂,室温静置2分钟后剧烈振摇试管多次,排尽反应产生的气体,全过程不可以少于10分钟;(3)中和 每管加入0.2-2ml中和剂,剧烈振摇试管多次,排尽反应产生的气体,全过程不可以少于10分钟;(4)将处理好的样品在测定处放置10分钟,待温度平衡后每管加入0.2-2ml还原剂,摇匀;(5)测定 每管加入0.2-2ml指示剂,摇匀,选定一管,一手用加样器快速加入0.2-2ml氧化剂,另一手同时启动秒表计时,并立即取出该试管摇匀,此时试液变为蓝色,随着反应的进行,试液将从蓝色变为蓝紫色,最后变为红色,当试液变为蓝紫色且刚出现红色(突变点)时停止秒表,记录反应时间(秒),重复以上操作,测定并记录其余样品管反应时间;(6)尿碘含量的计算采用直线回归方程法计算尿碘含量,因反应时间S(秒)的对数值lnS或lgS与碘浓度C(μg/L)的对数值lnC或lgC成线性关系,按双回归统计方法求出标准曲线的回归方程,lnC=a+blnS或lgC=a+blgS。其中a,b分别是曲线的截距和斜率,为常数,由回归统计方法求得,其在不一样的温度下为不同的常数,将样品管的反应时间(秒)代入标准曲线的回归方程,计算出样品碘含量(μg/L)。

  本发明用消解液(过氧化酰氯、次氯酸钠、二氧化氯或其中的混合物)在试管内分解尿中有机物来排除干扰物质;再通过解析剂分解过量的消解液和调节酸度;通过中和剂来调解酸度,并进一步分解残存的消解液;然后通过碘催化亚砷酸与硫酸铈反应,使用指示剂(Ferroin)指示反应终点,记录反应从开始到终点所需要的时间(秒)。

  本发明在检测中,先对碘标准溶液、尿样进行消解、解析、中和的前处理过程,这些过程建议在室外通风处或通风橱中进行,以避免刺激性气体的吸入。将处理好的样品在测定处放置10分钟,待温度平衡后,每管加入0.2-2ml还原剂,摇匀。

  测定时,每管加入0.2-2ml指示剂,摇匀。因指示剂在溶液中时间过长易钝化,一次加入的管数不要过多,以20管为宜。准备好秒表、记录本和一张白纸,以下进行单管操作。选定一管,一手用加样器快速加入0.2-2ml氧化剂,另一手同时启动秒表计时,并立即取出该试管摇匀,试液变为蓝色。以白纸为背景,观察试管内颜色的变化。随着反应的进行,试液将从蓝色变为蓝紫色,最后变为红色。当试液变为蓝紫色且刚出现红色(突变点)时停止秒表,记录反应时间(秒)。突变点的确定根据操作者的观察习惯,只要一致即可。

  尿碘含量的计算,采用直线回归方程法计算尿碘含量。因反应时间S(秒)的数值lnS或lgS与碘浓度C(μg/L)的对数值lnC或lgC成线性关系,将标准溶液浓度的对数对应其反应时间的对数输入函数计算器,按双回归统计方法求出标准曲线的回归方程,lnC=a+blnS或lgC=a+blgS。式中a、b分别是曲线的截距和斜率,在不一样的温度下为不同的常数。将样品管的反应时间(秒)代入标准曲线的回归方程,计算样品碘含量(μg/L)。本试剂盒灵敏度为5μg/l。

  本发明检验测试过程可以简化,解析剂和中和剂可以选择性加入,即碘标准溶液、尿样经消解后,先加入解析剂或中和剂,再加还原剂进行还原。中和剂、还原剂、指示剂可预先三者或其中二者混合后加入,同时进行中和、还原、指示过程或其中两过程。

  具体实施例方式试剂成分及含量消解液有效氯含量为0.6mol/l;解析剂脲含量为0.25mol/l;中和剂硫酸浓度为2.5mol/L;还原剂三氧化二砷含量为6.0×10-2mol/L;指示剂Ferroin含量为3.6×10-2mol/L;氧化剂硫酸铈铵的含量为7.0×10-3mol/L。

  检测结果按本发明的检测的新方法进行检测。其中,标准溶液和尿样各取0.2ml,每管其他6种试剂的用量均为0.5ml,在室温17℃下测得一组数据如下标准及样品(μg/L) 50 100 200 300400 样品1 样品2反应时间(S)案78.03 50.91 31.43 25.24 20. 45.96 32.32用函数计算器求得标准曲线反应时间代入回归方程,得出样品l的碘含量为115.1μg/L,样品2的碘含量为200.1μg/L。

  1.尿碘快速定量检测试剂盒,其特征是试剂盒由以下主要试剂成分组成,(1)消解液由过氧化酰氯、次氯酸钠、二氧化氯复合组成或其中的单一成分组成,其总有效氯含量(以Cl2计)在0.3~1.2mol./L,(2)解析剂,为脲溶液,其浓度以脲计,为0.1~1mol/L,(3)中和剂硫酸、盐酸或磷酸溶液,其酸度以氢离子浓度,计为1~10mol/L,(4)还原剂由三氧化二砷溶于酸性溶液中制备成的亚砷酸溶液,其含量以三氯化二砷计为1×10-3~0.5mol/L,(5)指示剂Ferroin(亚铁灵)溶液,其浓度以Ferroin计,为5.0×10-3~1.0×10-2mol/L,(6)氧化剂硫酸铈铵或硫酸铈溶液,含量为5×10-4~5×10-2mol/L。

  2.尿碘快速定量检测试剂盒检测尿碘的方法,其特征是具体步骤为(1)消解 准确移取50、100、200、300和400μg/L的系列碘标准溶液和尿样各0.1-1ml于试管中,各加0.2-2ml消解液,室温静置5分钟后剧烈振摇试管多次,致使反应产生的气体(主要为N2、O2和少量Cl2)排尽为止,消解全过程约需10-15分钟,(2)解析 每管加入0.2-2ml ml解析剂,室温静置2分钟后剧烈振摇试管多次,排尽反应产生的气体,全过程不可以少于10分钟,(3)中和 每管加入0.2-2ml中和剂,剧烈振摇试管多次,排尽反应产生的气体,全过程不可以少于10分钟(4)将处理好的样品在测定处放置10分钟,待温度平衡后每管加入0.2-2ml还原剂,摇匀,(5)测定 每管加入0.2-2ml指示剂,摇匀,选定一管,一手用加样器快速加入0.2-2ml氧化剂,另一手同时启动秒表计时,并立即取出该试管摇匀,此时试液变为蓝色,随着反应的进行,试液将从蓝色变为蓝紫色,最后变为红色,当试液变为蓝紫色且刚出现红色(突变点)时停止秒表,记录反应时间(秒),重复以上操作,测定并记录其余样品管的反应时间,(6)尿碘含量的计算采用直线回归方程法计算尿碘含量,因反应时间S(秒)的对数值lnS或lgS与碘浓度C(μg/L)的对数值lnC或lgC成线性关系,按双回归统计方法求出标准曲线的回归方程,lnC=a+blnS 或 lgC=a+blgS。其中a,b分别是曲线的截距和斜率,为常数,由回归统计方法求得,其在不一样的温度下为不同的常数,将样品管的反应时间(秒)代入标准曲线的回归方程,计算出样品碘含量(μg/L)。

  3.根据权利要求2所述的方法,其特征是碘标准溶液、尿样经消解后,加入解析剂或者中和剂,再加还原剂进行还原。

  4.根据权利要求2所述的方法,中和剂、还原剂、指示剂预先三者或其中二者混合后加入,同时进行中和、还原、指示过程或其中两过程。

  尿碘快速定量检测试剂盒及尿碘检测的新方法,试剂盒由消解液、解析剂、中和剂、还原剂、指示剂、氧化剂和碘系列标准溶液组成。检测时先用由过氧化酰氯、次氯酸钠、二氧化氯按特殊的比例组成的消解液在常温下消解尿样,分解尿中干扰碘测定的物质,再使用脲解析剂和酸中和剂分解残余的消解液和调节酸度,然后通过碘催化还原剂(亚砷酸)与氧化剂(硫酸铈或硫酸铈铵)反应,选用指示剂(Ferroin亚铁灵)指示反应终点,采用秒表记录反应时间。因反应时间(S)的对数值与碘含量(C)的对数值成线形定量关系,即lnC=a+blnS或lgC=a+blgS,由此来计算尿碘含量。本试剂盒检测快速、准确、灵敏度高

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